猪圆环病毒2型感染树突状细胞外泌体中差异miRNA分析

目的]本研究旨在探究猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）感染中，树突状细胞（Dendritic cell,DC）外泌体miRNA在调节免疫反应中的作用。方法]以正常的单核细胞来源树突状细胞（MoDC）来源外泌体（DEX）为空白对照组，病毒感染的MoDC来源外泌体（VDEX）为试验组，使用间接免疫荧光评估感染模型鉴定外泌体后，通过高通量测序技术分析两者中的差异miRNA。结果]间接免疫荧光结果显示，与PCV2共孵育的MoDC中有特异性绿色荧光，表明PCV2感染MoDC模型建立成功。纳米颗粒追踪技术结果显示，超速离心法提取的外泌体直径分别为130 nm和120 nm。Western blot结果显示，两组外泌体均存在特异性标记蛋白CD63和TSG101。高通量测序结果显示，与DEX组相比，VDEX组共504种miRNA发生显著变化（P<0.05），其中161种表达上调，343种表达下调。qPCR结果表明，与DEX相比，VDEX中ssc-miR-10b、ssc-miR-199a-3p-R-1、ssc-miR-532-5p、ssc-miR...