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苎麻RAPD反应体系的构建与优化
引用本文:刘立军,彭定祥,蒙祖庆. 苎麻RAPD反应体系的构建与优化[J]. 中国农学通报, 2006, 22(6): 35-35
作者姓名:刘立军  彭定祥  蒙祖庆
作者单位:华中农业大学植物科学技术学院中心实验室,湖北,武汉,430070
基金项目:国家863项目麻类作物高效育种技术及优质高产多抗新品种选育(2001AA241121)。
摘    要:以苎麻品种为材料,研究了苎麻RAPD分析过程中的影响因素,包括10×PCR Buffer、模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于苎麻RAPD分析的PCR反应体系:即在25μl反应体系中,引物浓度为0.4uM;模板DNA的用量为60~100ng;Mg2+浓度为1.8mM;dNTP浓度为0.2 mM;Taq酶用量为1U。适宜的扩增程序为先94℃变性4min,再94℃变性45s、38℃复性45s、72℃延伸2min共36个循环,最后72℃延伸5min,4℃保存。

关 键 词:高油玉米  高油玉米  高产优质栽培  数学模型  栽培模式  
收稿时间:2006-01-15
修稿时间:2006-01-152006-01-21

Optimization for RAPD Reaction System in Ramie(Boehmeria nivea L.Guad)
Liu Lijun,Peng Dingxiang,Meng Zuqing. Optimization for RAPD Reaction System in Ramie(Boehmeria nivea L.Guad)[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2006, 22(6): 35-35
Authors:Liu Lijun  Peng Dingxiang  Meng Zuqing
Affiliation:(Central Lab. of College of Plant Science &Technology, HZAU, Wuhan 430070)
Abstract:The factors influencing RAPD Analysis, including 10×PCR Buffer, the concentration of DNA template, Mg2+, dNTP, primers, Taq polymerase, Thermal cycles and annealing temperature in Ramie were studied. PCR system for RAPD in Ramie has been found: in 25μl reaction solution, contained 0.4μM random primers, 60~100ng DNA template, 1.8mM Mg2+, 0.2 mM dNTP, 1U Taq polymerase. The suitable procedure is one cycle 94℃ for 4min; denaturing at 94℃ for 45s; primer annealing at 38℃ for 45s, extension at 72℃ for 2min, 36 cycles; extension at 72℃ for 5min at last and then remain at 4℃.
Keywords:Ramie   RAPD   System optimisation
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