| SSH法构建奶牛乳房炎抗性相关基因的cDNA文库 |
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| 引用本文： | 陶金忠,张勇,张进隆,杨永新,赵兴绪. SSH法构建奶牛乳房炎抗性相关基因的cDNA文库[J]. 中国兽医学报, 2009, 29(5) |
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| 作者姓名： | 陶金忠 张勇 张进隆 杨永新 赵兴绪 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070 |
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| 摘 要： | 以经产荷斯坦奶牛的乳腺组织为材料,抽提总的RNA,分离提纯Poly(A)+RNA,反转录并合成单链和双链的cDNA,经酶切形成200～800 bp的片段.将患乳房炎奶牛的cDNA分成2组,分别与不同的接头连接,再与正常奶牛的cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性的PCR扩增;第2次PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞进行文库扩增,构建了具有高消减效率的奶牛乳房炎抗性相关cDNA文库.文库扩增后得到361个白色阳性克隆,随机挑选克隆进行PCR签定,插入片段主要分布在200～800 bp.文库的成功构建为进一步筛选、克隆与奶牛乳房炎抗性相关基因奠定了基础,对研究奶牛乳房炎抗性的分子机制以及乳房炎的综合防制具有重要意义.
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| 关 键 词： | 牛 房炎 DNA文库 |
Construction of mastitis resistant cDNA library in dairy cows using suppression subtractive hybridization |
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| TAO Jin-zhong,ZHANG Yong,ZHANG Jin-long,YANG Yong-xin,ZHAO Xing-xu. Construction of mastitis resistant cDNA library in dairy cows using suppression subtractive hybridization[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2009, 29(5) |
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| Authors: | TAO Jin-zhong ZHANG Yong ZHANG Jin-long YANG Yong-xin ZHAO Xing-xu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SSH |
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