| 中华蜜蜂王浆多肽Apisimin基因转录、克隆与表达研究 |
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| 引用本文： | 邢丽苹,沈立荣,乌晓云,施婉君,高其康,程家安,张传溪.中华蜜蜂王浆多肽Apisimin基因转录、克隆与表达研究[J].上海交通大学学报(农业科学版),2006,24(5):460-464,470. |
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| 作者姓名： | 邢丽苹 沈立荣 乌晓云 施婉君 高其康 程家安 张传溪 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,昆虫科学研究所,杭州,310029
2. 上海交通大学,资源环境科学系,上海,20110 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30271008) |
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| 摘 要： | 构建中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂头部cDNA文库并进行了测序,从8568个表达序列标签(expression sequencetag,EST)中获得96个Apisimin基因克隆,结果表明Apisimin基因是一个高丰度转录的基因。进一步对克隆分析表明该基因cDNA全长为379 nt,包含一个237 nt、可以编码78个氨基酸的ORF。推导的Apisimin蛋白N端含有一个由24个氨基酸残基组成的信号肽,后端为54残基、预计分子量为5.9kDa的成熟肽。该ORF与意大利蜜蜂和印度蜜蜂的Apisimin基因核苷酸同源性分别为100%和95%。将成熟肽编码区进行亚克隆,构建了Apisimin与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEX/apisimin,并将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达。SDS-PAGE和薄层扫描表明,表达的融合蛋白分子量为31 kDa,表达量占细菌总蛋白的22.1%,约50%是可溶性的。通过亲和柱进一步纯化了表达的融合蛋白。
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| 关 键 词： | 王浆多肽 中华蜜蜂 序列分析 原核表达 |
| 文章编号： | 1671-9964（2006）05-0460-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-19 |
| 修稿时间： | 2006-06-19 |
Analysis of Apisimin cDNA from Apis cerana cerana and Its Expression in E. coli |
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| XING Li-ping,SHEN Li-rong,WU Xiao-yun,SHI Wan-jun,GAO Qi-kan,CHENG Jia-an,ZHANG Chuan-xi.Analysis of Apisimin cDNA from Apis cerana cerana and Its Expression in E. coli[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2006,24(5):460-464,470. |
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| Authors: | XING Li-ping SHEN Li-rong WU Xiao-yun SHI Wan-jun GAO Qi-kan CHENG Jia-an ZHANG Chuan-xi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Apis cerana cerana Apisimin sequence analysis prokaryotic expression |
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