牛羊肉掺假微流控检测方法的研究

基于环介导等温扩增技术(LAMP),建立掺假牛羊肉微流控快速检测方法。使用Takara核酸提取试剂盒分别提取14种肉类DNA,根据特异性基因16SrRNA,分别设计牛、羊、猪、鸡、鸭、狐狸、马3～5组特异性引物。在LAMP反应管优化实验中,进行最佳引物筛选实验、特异性实验;芯片验证实验中进行蝶式芯片点样、芯片特异性实验。最佳引物序列:牛为N3、羊为Y4、猪为Z2、鸡为J3、鸭为ya2、狐狸为H1,马为M2。特异性实验中,每种肉类的核酸,只有在与之对应的引物作用下,才能发生扩增反应。芯片验证实验结果显示,无论是单一肉类品种的DNA,还是几种肉类混合的DNA,微流控芯片都能准确无误的检测到相应的肉类基因的存在,特异性良好。