| 柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究 |
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| 引用本文： | 彭维刚,黄 妮,林 青. 柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的克隆表达及免疫保护性研究[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2011, 39(12): 1-7 |
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| 作者姓名： | 彭维刚 黄 妮 林 青 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 动物医学院 |
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| 基金项目： | 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金项目（SKLVEB2009KFKT7003） |
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| 摘 要： | 【目的】对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌株RB1-a基因进行克隆与表达,检测表达产物的免疫保护性,为鸡球虫基因工程疫苗的研制奠定基础。【方法】以纯化的E.tenella杨凌株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出其RB1-a基因,测序后进行序列分析。然后将RB1-a基因N端不含信号肽序列克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a-RB1-a重组质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达出重组蛋白,将重组蛋白纯化后免疫雏鸡,对其免疫效果进行评价。【结果】柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a基因的开放阅读框(ORF)包含618个碱基,编码205个氨基酸,与GenBank报道的柔嫩艾美耳球虫PAPa46株ORF序列相似性为99.84%,两者推导的氨基酸序列相同。SDS-PAGE分析表明,重组质粒表达分子质量为42ku的融合蛋白。免疫效果测定结果显示,RB1-a免疫组和RB1-a+佐剂免疫组的相对增重率分别为64.2%和69.4%,卵囊减少率分别达37.22%和30.56%,抗球虫指数分别为146.2和150.4。【结论】RB1-a基因具有很强的保守性,种间差异不大;RB1-a重组蛋白具有一定的免疫保护效果。
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫杨凌株 RB1-a基因 克隆 表达 免疫保护 |
| 收稿时间： | 2011-03-05 |
Studies on cloning and expression of RB1-a gene of Eimeria tenella YL strain and immune protection of expressed products in chickens |
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| PENG Wei-gang,HUANG Ni,LIN Qing,HU Bing,ZHANG San-dong,YU San-ke. Studies on cloning and expression of RB1-a gene of Eimeria tenella YL strain and immune protection of expressed products in chickens[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2011, 39(12): 1-7 |
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| Authors: | PENG Wei-gang HUANG Ni LIN Qing HU Bing ZHANG San-dong YU San-ke |
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| Affiliation: | PENG Wei-gang,HUANG Ni,LIN Qing,HU Bing,ZHANG San-dong,YU San-ke(College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eimeria tenella YL strain RB1-a gene cloning expression immune protection |
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