水稻黑条矮缩病毒玉米分离物基因组S8和S9的序列分析及其原核表达 |
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引用本文: | 孙丽英,徐佳凌,方守国,王朝辉,韩成贵,李大伟,于嘉林.水稻黑条矮缩病毒玉米分离物基因组S8和S9的序列分析及其原核表达[J].农业生物技术学报,2004,12(3):306-311. |
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作者姓名: | 孙丽英 徐佳凌 方守国 王朝辉 韩成贵 李大伟 于嘉林 |
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作者单位: | 1. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;中国农业大学农学与生物技术学院,北京,100094 2. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京,100094 3. 中国农业大学农学与生物技术学院,北京,100094 |
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基金项目: | 国家转基因植物研究与产业化专项(.J-A-027)资助课题. |
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摘 要: | 通过RT-PCR获得了玉米粗缩病病毒湖北分离物(Hbm)基因片段S8和S9的全长cDNA克隆,并测定了它们的全序列。S8全长1936bp,其编码链只含1个ORF,编码1个由591个氨基酸组成、分子量约为68kD蛋白;S9全长l900bp,含有两个非重叠的ORF,分别编码由347个和209个氨基酸组成、分子量分别约为40kD和24kD蛋白。序列分析表明,Hbm-S8和S9与水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)中国不同分离物之间的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为94.4%~98.9%和96.0%~99.0%,且与日本RBSDV的序列同源性高于与玉米粗缩病毒相应片段的序列同源性,进一步证明了引起我国玉米粗缩病的病原为RBSDV。SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,RBSDV8和9编码的蛋白可在大肠杆菌(Escherichia coil)中高效表达。以这些蛋白为抗原,制备了抗血清。用Western blot方法在感病的玉米(Zea mays)植株中可检测到RBSDV-Hbm S8和S9 ORF1编码的蛋白。
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关 键 词: | 水稻黑条矮缩病毒 玉米粗缩病 基因组片段 序列分析 原核表达 |
修稿时间: | 2003年5月26日 |
Sequence Analysis and Prokaryotic Expression of Genomic Segments 8 and 9 of Rice black-streaked dwarf virus Isolated from Maize |
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Abstract: | |
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