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AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析
引用本文:张辉,李晓雨,狄冉,刘玉芳,储明星. AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(1): 226-234. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.01.025
作者姓名:张辉  李晓雨  狄冉  刘玉芳  储明星
作者单位:1. 河北工程大学生命科学与食品工程学院, 邯郸 056021;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室, 北京 100193
基金项目:国家自然科学基金(31861143012);河北省自然科学基金青年项目(C2019402261);国家肉羊产业技术体系专项(CARS-38);中国农业科学院科技创新工程(ASTIP-IAS13);农业科研杰出人才及其创新团队项目(农办人[2015]62号);国家万人计划科技创新领军人才项目(W02020274)
摘    要:试验旨在检测5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(AANAT)基因在绵羊休情季节和繁殖季节(卵泡期和黄体期)卵巢组织中的转录差异,并分析转录差异是否由DNA甲基化修饰程度改变所导致。试验采用自然环境条件和饲养管理一致,且体重差异在0.5 kg范围内的空怀母滩羊作为试验动物,采集其休情期、卵泡期和黄体期(每个时期3只)的卵巢组织,采用SYBR染料法进行实时荧光定量PCR检测AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢组织中的转录水平。随后针对转录水平有差异的两个时期(休情期和卵泡期)的样本,利用MethPrimer 2.0在线软件预测AANAT基因启动子区和第一外显子区的CpG岛;用重亚硫酸盐测序法(BSP法)检测AANAT基因启动子区及第一外显子区的甲基化程度。试验结果显示,滩羊休情期卵巢组织中AANAT基因转录水平显著低于卵泡期的AANAT基因转录水平(P<0.05),休情期与黄体期滩羊卵巢组织中AANAT基因的转录水平差异不显著(P>0.05)。滩羊卵巢组织中AANAT基因启动子区上存在着一个长度为173 bp的CpG岛,第一外显子区存在着一个长度为118 bp的CG岛。然而,两个甲基化岛区内的单个CpG位点甲基化程度在滩羊休情期和卵泡期之间均不存在显著差异,暗示AANAT基因的表达受甲基化修饰外的因素调控。本研究结果可为进一步探讨AANAT基因在季节性发情和卵泡成熟中的功能提供参考资料。

关 键 词:滩羊  季节性发情  AANAT基因  转录  DNA甲基化  
收稿时间:2020-07-09

Analysis on Difference of Transcription and DNA Methylation Level of AANAT Gene in Ovary of Tan Sheep at Different Reproductive Stages
ZHANG Hui,LI Xiaoyu,DI Ran,LIU Yufang,CHU Mingxing. Analysis on Difference of Transcription and DNA Methylation Level of AANAT Gene in Ovary of Tan Sheep at Different Reproductive Stages[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2021, 48(1): 226-234. DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.01.025
Authors:ZHANG Hui  LI Xiaoyu  DI Ran  LIU Yufang  CHU Mingxing
Affiliation:1. College of Life Sciences and Food Engineering, Hebei University of Engineering, Handan 056021, China;2. Key Laboratory of Animal Genetics, Breeding and Reproduction of Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:
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