| 菊花SSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 李亚慧,黄丛林,董然.菊花SSR-PCR反应体系的建立和优化[J].北方园艺,2012(13):127-131. |
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| 作者姓名： | 李亚慧 黄丛林 董然 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学园艺学院,吉林长春130118;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京100097;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100097;吉林农业大学园艺学院,吉林长春,130118 |
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| 基金项目： | 北京市科委资助项目，科技部科技支撑计划资助项目，北京市园林绿化局花卉育种研发资助项目 |
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| 摘 要： | 为快速确定菊花SSR反应体系,利用正交实验设计L16(45)对菊花基因组SSR-PCR反应体系的5个因素(模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq酶)在4个水平上进行正交设计,筛选出适合菊花的最佳SSR-PCR反应体系,进一步利用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平。结果表明:建立菊花基因组DNA SSR-PCR反应体系为25μL:60ng模板DNA、2.0mmol/L Mg2+、0.1mmol/L dNTP、0.3μmol/L引物、1UTaq酶。并对菊花引物进行梯度退火试验,其最佳退火温度在53.1℃;扩增程序是:95℃预变性5min;32个循环的94℃变性50s、53.1℃退火50s、72℃延伸50s;72℃延伸8min,4℃保存。该体系的建立为今后菊花SSR分析奠定了基础。
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| 关 键 词： | 菊花 SSR标记 正交设计 反应体系优化 |
Establishment and Optimization of Chrysanthemum SSR-PCR Reaction System |
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| LI Ya-hui
,
HUANG Cong-lin
,
DONG Ran.Establishment and Optimization of Chrysanthemum SSR-PCR Reaction System[J].Northern Horticulture,2012(13):127-131. |
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| Authors: | LI Ya-hui HUANG Cong-lin DONG Ran |
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| Institution: | 1(1.College of Gardening,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118;2.Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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