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嵩草AFLP分析体系的建立及引物筛选
引用本文:郑红梅,呼天明,王佺珍.嵩草AFLP分析体系的建立及引物筛选[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(3):33-38.
作者姓名:郑红梅  呼天明  王佺珍
作者单位:1. 西北农林科技大学,资源环境学院,陕西,杨凌,712100
2. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100
基金项目:科技部国际科技合作项目 , 西藏自治区科技攻关项目
摘    要:【目的】建立一套适用于嵩草的AFLP技术体系。【方法】参考前人在其他物种上的研究结果,对嵩草AFLP体系的影响因素(包括模板DNA的制备、MseⅠ/EcoRⅠ以及T4 DNA连接酶的浓度、反应时间以及反应体系的组成等)进行研究,建立适用于嵩草的AFLP分析体系,并对引物进行了筛选。【结果】用于酶切的嵩草基因组DNA模板以600 ng为宜,连接最适反应时间为10 h,预扩增产物最适稀释倍数为5倍。E-ACC+M-CAG、E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG 3对引物均适合于嵩草AFLP分析,其中以E-ACA+M-CAG引物组合效果最佳,扩增出101条多态性带,多态性带比率为99.02%。【结论】建立的AFLP技术体系可用于嵩草AFLP分析,用该体系可得到条带清晰多态性好的嵩草AFLP指纹图谱。适合嵩草种质资源研究的引物组合有E-ACC+M-CAG,E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG,其中E-ACA+M-CAG组合的效果最好。

关 键 词:嵩草  AFLP体系  引物筛选
文章编号:1671-9387(2008)03-0033-06
收稿时间:5/8/2007 12:00:00 AM
修稿时间:2007年5月8日

Establishment of AFLP reaction system and screening of primer pairs on Kobresia
ZHENG Hong-mei,HU Tian-ming,WANG Quan-zhen,ZHANG Ouo-yun,SONG Jiang-hu,HU Xiao-ning.Establishment of AFLP reaction system and screening of primer pairs on Kobresia[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(3):33-38.
Authors:ZHENG Hong-mei  HU Tian-ming  WANG Quan-zhen  ZHANG Ouo-yun  SONG Jiang-hu  HU Xiao-ning
Institution:b (a College of Resource and Environment,b College of Animal Science and Technology,c Key Laboratory Molecular Biology of Agriculture Shaanxi,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Kobresia  AFLP  screening of primer pairs
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