| 紫花苜蓿MsRBP基因的克隆、分析及烟草的遗传转化 |
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| 引用本文： | 王慧敏,龙瑞才,沈益新,康俊梅,张铁军,张瑜,杨青川.紫花苜蓿MsRBP基因的克隆、分析及烟草的遗传转化[J].草地学报,2013,21(2). |
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| 作者姓名： | 王慧敏 龙瑞才 沈益新 康俊梅 张铁军 张瑜 杨青川 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物科技学院,江苏南京,210095;重庆大学农学及生命科学研究院,重庆,400044;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094;南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100094 |
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| 基金项目： | "十二五"国家科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 采用RACE技术以一段紫花苜蓿(Medicago sativa)盐诱导基因的EST(expressed sequence tag)序列为模板设计引物克隆此基因的全长序列.序列分析结果表明,该基因全长1551 bp,包含一个1230 bp的最大开放阅读框,编码409个氨基酸,包含3个RNA结合蛋白结构域(RRM domain),命名为MsRBP(GenBank accession No.JN986878.1).亚细胞定位分析表明此基因编码蛋白定位于细胞核.经同源比对和进化树分析,MsRBP基因编码的氨基酸序列与截形苜蓿(Medicago truncatula)、大豆(Gl ycine max)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)等物种中的某些RNA结合蛋白的氨基酸序列具有很高的相似性.RT-PCR (Real-time PCR)分析结果表明,在NaCl,ABA和PEG胁迫下MsRBP基因的表达水平均上调,推测该基因可能在紫花苜蓿逆境胁迫调控中发挥重要作用.经构建植物超表达载体pBI21-MsRBP,采用农杆菌介导法对烟草(Nicotiana tabacum)进行遗传转化,获得了抗性转化再生植株.通过PCR,RT-PCR及GUS组织化学染色分析表明:MsRBP基因在烟草的基因组中能够进行转录和表达.本研究为该基因的功能鉴定与调控机制研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 紫花苜蓿 RNA结合蛋白 实时定量RT-PCR 表达分析 烟草转化 |
Cloning of an RNA-binding Protein Gene from Alfalfa and Expression in Tobacco |
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| Abstract: | |
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