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烟夜蛾泛素延伸蛋白基因的克隆与表达
引用本文:涂洪涛,安世恒,郭线茹,罗梅浩,吴少英,原国辉. 烟夜蛾泛素延伸蛋白基因的克隆与表达[J]. 农业生物技术学报, 2006, 14(6): 884-888
作者姓名:涂洪涛  安世恒  郭线茹  罗梅浩  吴少英  原国辉
作者单位:河南农业大学植物保护学院,郑州,450002
基金项目:河南农业大学校科研和教改项目
摘    要:应用RT-PCR技术,从烟夜蛾(Helicoverpa assulta)幼虫脂肪体组织总RNA中反转录扩增泛素延伸蛋白基因的cDNA片段,扩增得到的片段全长390bp,编码一个长为129个氨基酸残基的蛋白质,预测分子量14.8kDa。同源性分析表明,此cDNA序列为ubiquitin-53aa extension protein(ubi-53,UBE)基因,在泛素蛋白后融合了一个核糖体L40蛋白(ribosomal L40 protein)。使用Clustal W软件,对cDNA编码的氨基酸序列进行了同源性分析,分析表明:烟夜蛾的泛素延伸蛋白氨基酸序列与其他真核生物泛素延伸蛋白氨基酸序列高度同源(90%-98%),与棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)泛素的同源性为69%。将烟夜蛾的UBE基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG进行诱导表达,电泳检测到一条约40kDa大小的外源蛋白,用鼠抗GST抗体进行Western blot检测表明原核表达蛋白是目的蛋白。

关 键 词:烟夜蛾  泛素延伸蛋白  基因克隆  原核表达
文章编号:1006-1304(2006)06-0884-05
收稿时间:2006-05-15
修稿时间:2006-05-29

Cloning of Ubiquitin Extension Protein Gene from Helicoverpa assulta and Its Expression in Escherichia coli
TU Hong-tao,AN Shi-heng,GUO Xian-ru,LUO Mei-hao,WU Shao-ying,YUAN Guo-hui. Cloning of Ubiquitin Extension Protein Gene from Helicoverpa assulta and Its Expression in Escherichia coli[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2006, 14(6): 884-888
Authors:TU Hong-tao  AN Shi-heng  GUO Xian-ru  LUO Mei-hao  WU Shao-ying  YUAN Guo-hui
Affiliation:College of Plant Protection, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China
Abstract:
Keywords:Helicoverpa assulta  ubiquitin extension protein  gene cloning  prokaryotic expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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