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藏羊源屎肠球菌的分离、鉴定及体外益生特性
引用本文:徐淑琴,马祥兆,陈晓慧,贺曦,贺晓龙,冶贵生.藏羊源屎肠球菌的分离、鉴定及体外益生特性[J].安徽农业大学学报,2022,49(2):272.
作者姓名:徐淑琴  马祥兆  陈晓慧  贺曦  贺晓龙  冶贵生
作者单位:青海大学农牧学院,西宁 810016; 青海省动物疾病病原诊断与绿色防控技术研究重点实验室,西宁 810016)
基金项目:青海省科技厅项目(2020-ZJ-928, 2022-NK-118)和2021青海省“高端创新人才”千人计划共同资助。
摘    要:为了获得藏羊源益生菌,利用形态学、生化试验和分子生物学方法对屎肠球菌进行分离与鉴定,通过抑菌试验、耐受性试验、生长曲线与产酸能力试验以及药敏试验对屎肠球菌分离菌株的体外益生特性进行评价。结果显示,藏羊源屎肠球菌分离菌株EF1-mh在Pfizer肠球菌选择性琼脂上呈棕黑色菌落,胆汁七叶苷培养呈黑色等生理生化结果符合肠球菌特征,分离株16S rDNA序列分别与参考屎肠球菌序列相似性均达99%以上,PCR成功扩增出种特异性基因ddladk基因,明确分离菌株EF1-mh是屎肠球菌。分离株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和产气荚膜梭菌分离株的抑菌圈直径均在8.64 mm以上;分离菌株具有一定耐受性,于60 ~ 80 ℃水浴30 min培养16 h后,活菌浓度基本恢复。 在pH 2.0培养16 h活菌浓度为3.4×102 CFU·mL-1;在pH 3.0培养4 h,活菌浓度为9.5×106 CFU·mL-1;在0.3%胆盐的 MRS 培养液中培养8 h活菌浓度为1.37×103 CFU·mL-1,在1%和2%胆盐的培养液中培养16 h仍有存活;生长速度快,4 h后进入了对数期,且培养10 h后菌液pH在4.3左右,产酸能力强,对氨苄西林、克林霉素等抗生素表现敏感,对多粘菌素B、头孢氨苄等抗生素表现为耐药。研究表明藏羊源屎肠球菌分离菌株EF1-mh具有较好的体外益生特性,这将有利于为藏羊源屎肠球菌的研究。

关 键 词:屎肠球菌  藏羊  分离  鉴定  益生性

Isolation and identification of Enterococcus faecium from Tibetan sheep and its probiotic characteristics in vitro
XU Shuqin,MA Xiangzhao,CHEN Xiaohui,HE Xi,HE Xiaolong,YE Guisheng.Isolation and identification of Enterococcus faecium from Tibetan sheep and its probiotic characteristics in vitro[J].Journal of Anhui Agricultural University,2022,49(2):272.
Authors:XU Shuqin  MA Xiangzhao  CHEN Xiaohui  HE Xi  HE Xiaolong  YE Guisheng
Institution:College of Agriculture and Animal Husbandry, Qinghai University, Xining 810016; Qinghai Provincial Key Laboratory of Pathogen Diagnosis for Animal Diseases and Green Technical Research for Prevention and Control, Xining 810016
Abstract:
Keywords:Enterococcus faecium  Tibetan sheep  isolation  identification  probiotics
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