柞蚕血球细胞体外培养及对核型多角体病毒的感染研究 |
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作者姓名: | 岳冬梅 王林美 李树英 范琦 叶博 赵振军 张波 |
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作者单位: | 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所,辽宁大连,116024 |
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基金项目: | 辽宁省自然科学基金项目(201102098) |
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摘 要: | 分别采用Grace、TC-100和MGM-448加20%胎牛血清和10%苯基硫尿做为细胞原代培养基,在27℃,pH6.2~6.4的条件下,对5龄柞蚕(Antheraea pernyi)幼虫血球细胞进行体外培养,发现细胞在培养1h后基本贴壁,在相差倒置显微镜下观察三种培养基细胞形态各异,原代培养的细胞主要是椭圆形、梭形和不规则形,进行了45d培养试验,观察结果表明:三种培养基中Grace培养基优于其他两种,其新生细胞增殖较快,细胞透明,大约10d左右即基本长满瓶底,15d进行第一次传代,传代培养细胞主要以园形和椭圆形为主.利用Grace培养基培养传代第2代的细胞进行柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的感染实验,通过相差倒置显微镜和电子显微镜观察呈现出典型的细胞病理变化,感染7d细胞感染率可达75%.
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关 键 词: | 柞蚕 血球细胞 细胞培养 核型多角体病毒 |
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