| 小鼠干扰素应答基因(Ifrg15)的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化 |
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| 引用本文： | 丁彪,刘一飞,张运海,李文雍. 小鼠干扰素应答基因(Ifrg15)的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化[J]. 农业生物技术学报, 2010, 18(6). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.021 |
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| 作者姓名： | 丁彪 刘一飞 张运海 李文雍 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，安徽高校省级自然科学研究规划重点项目 |
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| 摘 要： | 为研究一个可能的干扰素应答基因(interferon responsive gene 15,Ifrg15)所编码蛋白质的生物学功能,对昆明小鼠(Mus musculus)基因组DNA进行PCR扩增获得Ifrg15(393 bp),并将其克隆到pGEM-T载体,经测序鉴定后用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切下Ifrgl5基因片段并和双酶切后的表达载体pET-41(c)进行连接,然后转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞.对重组克隆用IPTG诱导融合蛋白的表达,并进行分离纯化.结果表明,本实验在E.coli BL21(DE3)菌株中成功地高效表达、并在变性亲和层析条件下成功纯化了GST&6xHis-Ifrg15融合蛋白.
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| 关 键 词： | 干扰素应答基因(Ifrg15) 基因克隆 原核表达 亲和层析 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Mouse Interferon Responsive Gene (Ifrg15) and Affinity Purification of Its Fusion Protein |
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| Ding Biao,Liu Yifei,Zhang Yunhai,Li Wenyong. Cloning and Prokaryotic Expression of Mouse Interferon Responsive Gene (Ifrg15) and Affinity Purification of Its Fusion Protein[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, 18(6). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.021 |
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| Authors: | Ding Biao Liu Yifei Zhang Yunhai Li Wenyong |
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