| 利用RNA干扰抑制牛胎儿成纤维细胞中朊蛋白基因prnp的表达 |
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| 引用本文： | 程胖,张海林,宋永利,战丽萍,张涌.利用RNA干扰抑制牛胎儿成纤维细胞中朊蛋白基因prnp的表达[J].农业生物技术学报,2010,18(6). |
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| 作者姓名： | 程胖 张海林 宋永利 战丽萍 张涌 |
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| 基金项目： | 国家"抗病转基因牛新品种培育" |
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| 摘 要： | 疯牛病是由朊蛋白基因prnp编码的正常朊蛋白PrPc发生构象变化为致病性朊蛋白PrPsc而引起的传染性疾病,PrPsc在中枢神经的聚集引发了动物的传染性海绵状脑病.降低(下调)PrPc的表达量使其减少向PrPsc转化,是抑制疯牛病的有效途径.本研究利用RNAi技术,针对牛源cDNA序列设计了3段PrPc干扰序列及一个阴性对照,将其连接到RNA干扰载体pGenesil-1上,转染牛胎儿成纤维细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测有干扰序列的有效性,并用700μg/mL G418对细胞进行药物筛选.结果表明,3对干扰片段的抑制效率分别是51.2%、85.7%和74.6%,阴性对照的干扰效率是2.05%,得到了一个较为有效地干扰片段,并且筛选出了稳定转染的细胞单克隆,为进一步的体细胞核移植提供供体细胞.
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| 关 键 词： | 传染性海绵状脑病 朊蛋白 RNAi 朊蛋白基因prnp 牛海绵状脑病 牛胎儿成纤维细胞 |
Inhibition of Gene Expression of prnp in Bovine Fetal Fibroblast Cells by RNA Interference Technology |
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| Cheng Pang,Zhang Hailin,Song Yongli,Zhan Liping,Zhang Yong.Inhibition of Gene Expression of prnp in Bovine Fetal Fibroblast Cells by RNA Interference Technology[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2010,18(6). |
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| Authors: | Cheng Pang Zhang Hailin Song Yongli Zhan Liping Zhang Yong |
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