| 抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达 |
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| 引用本文： | 周昊,胡永新,常星,孙举,仝舟,毕玉海,吴晓东,尹燕博. 抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达[J]. 中国兽医学报, 2022, 0(1): 6-11 |
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| 作者姓名： | 周昊 胡永新 常星 孙举 仝舟 毕玉海 吴晓东 尹燕博 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学动物医学院;中国动物卫生与流行病学中心;青岛博隆基因生物工程有限公司;中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生与免疫学重点实验室 |
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| 基金项目： | 青岛博隆基因工程有限公司提供资金支持。 |
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| 摘 要： | 为构建抗非洲猪瘟病毒(ASFV)噬菌体单链抗体文库，并获得抗ASFV的单链抗体，本试验利用自然感染ASFV猪的外周血淋巴细胞提取的mRNA,反转录获得cDNA后分别扩增出猪IgG抗体重链和轻链的可变区基因，构建scFv单链抗体后连接至pComb3XSS载体，构建噬菌体抗体展示文库，经过3轮“吸附、洗脱、富集”的筛淘过程，成功获得1株能够与ASFV蛋白特异性结合的抗体，并验证了该抗体的反应能力。根据筛选得到的可变区序列构建完整抗体使用HEK293A细胞进行真核表达与验证。结果表明，成功构建了库容量约为9.2×1011PFU/mL抗ASFV噬菌体单链抗体文库，筛选并得到1株与ASFV病毒蛋白亲和性较高的单链抗体，使用真核表达系统成功表达了该株重组抗体。该研究为ASFV的诊断和治疗奠定了一定基础。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 单链抗体 噬菌体抗体文库 真核表达 |
Screening and expression of recombinant antibodies against African swine fever virus based on antibody phage display technology |
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| ZHOU Hao,HU Yongxin,CHANG Xing,SUN Ju,TONG Zhou,BI Yuhai,WU Xiaodong,YIN Yanbo. Screening and expression of recombinant antibodies against African swine fever virus based on antibody phage display technology[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2022, 0(1): 6-11 |
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| Authors: | ZHOU Hao HU Yongxin CHANG Xing SUN Ju TONG Zhou BI Yuhai WU Xiaodong YIN Yanbo |
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| Affiliation: | (College of Veterinary Medicine,Qingdao Agricultural University,Qingdao,Shandong 266109,China;China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao,Shandong 266032,China;Qingdao Bolong Gene Bioengineering Co.,Ltd.,Qingdao,Shandong 266041,China;CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology,Institute of Microbiology,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ASFV single chain antibody fragment antibody phage library eukaryotic expression |
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