水稻OsRZFP34基因逆境表达特征及其启动子的克隆与分析

采用qRT–PCR技术分析水稻OsRZFP34在高温(42 ℃)、低温(4 ℃)、10%聚乙二醇(PEG)6000模拟干旱、高盐(100 mmol/L NaCl)和脱落酸(ABA)处理(100 μmol/L)下的表达模式；克隆OsRZFP34基因启动子，并利用在线软件New PLACE和PlantCARE对其序列进行顺式作用元件分析；构建OsRZFP34pro::GUS表达载体并转化水稻；通过组织化学染色和GUS酶活性检测，分析在不同胁迫处理条件下OsRZFP34启动子驱动GUS基因表达的活性。qRT–PCR分析结果表明，上述5种处理均能不同程度地诱导OsRZFP34的表达，其中高温胁迫对其表达的诱导程度最强，而ABA对其表达只有微弱的诱导。顺式作用元件分析结果表明，该启动子上包含有多个与逆境响应、激素响应以及Ca2+信号转导相关元件。GUS组织化学染色和荧光分析结果显示，OsRZFP34基因启动子的活性受到高温、低温、PEG、盐和ABA的调控，表明该启动子是受多种逆境诱导的诱导型启动子。