| 脑特异性分子标志物vsnl1基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 褚澄,薛利军,赵忠新. 脑特异性分子标志物vsnl1基因的克隆及原核表达[J]. 扬州大学学报(农业与生命科学版), 2008, 29(2) |
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| 作者姓名： | 褚澄 薛利军 赵忠新 |
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| 作者单位： | 第二军医大学,长征医院,上海,200003;扬州市第一人民医院,江苏,扬州,225001;南京军区,南京总医院,江苏,南京,210002;第二军医大学,长征医院,上海,200003 |
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| 摘 要： | 从健康BALB/c小鼠脑组织提取总RNA,逆转录获得cDNA.根据GenBank公布的视锥蛋白样基因1(vsnl1)基因序列设计引物,以鼠脑cDNA为PCR模板扩增vsnl1.将目的片段克隆至pMD18-T载体,经酶切和测序鉴定重组质粒pMDT-v.将vsnl1基因亚克隆至6×His原核表达载体pROEX-HTb,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达和Ni-NTA柱纯化,并采样进行SDS-PAGE分析.结果表明:RT-PCR扩增产生了与vsnl1大小吻合的目的片段,测序及BLAST比对提示与已公布序列的同源性为99%,将序列提交GenBank.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导,重组质粒pROEX-v转化菌表达了约22ku的蛋白,与预期分子量大小一致.
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| 关 键 词： | 脑 分子标志物 vsnl1基因 克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of the specific brain biomarker vsnl1 gene |
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| CHU Cheng,XUE Li-jun,ZHAO Zhong-xin. Cloning and prokaryotic expression of the specific brain biomarker vsnl1 gene[J]. Journal of Yangzhou University(Agricultural and Life Science Edition), 2008, 29(2) |
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| Authors: | CHU Cheng XUE Li-jun ZHAO Zhong-xin |
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| Affiliation: | 1.Changzheng Hospital;Second Military Med Univ;Shanghai 200003;China;2.Yangzhou First People's Hosp;Yangzhou 225001;3.Nanjing Gen Hosp of Nanjing Military Command;Nanjing 210002;China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | brain biomarker visinin-like 1 cloning prokaryotic expression |
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