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猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达
引用本文:葛丽,李震,于瑞嵩,刘惠莉,张德福,周智爱,尹逊和. 猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达[J]. 中国兽医学报, 2005, 25(3): 289-292
作者姓名:葛丽  李震  于瑞嵩  刘惠莉  张德福  周智爱  尹逊和
作者单位:1. 上海市农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018
2. 上海市农业科学院,畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106
3. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018
基金项目:上海市农业科学院中青年学术和技术带头人培养基金项目
摘    要:将猪α干扰素(PoIFN-α)基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,电转化毕赤酵母KM71H菌株,抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子,以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY/BMMY培养基和YPG培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot印迹杂交结果证实,表达产物为重组PoIFN-α融合蛋白,经细胞毒性试验检测(WISH/VSV系统),表达产物的抗病毒活性为4.1×104IU/mL。

关 键 词:毕赤酵母 干扰素基因 分泌表达 分泌型表达载体 Western IFN-α 猪 重组菌株 表达产物 PCR鉴定 抗病毒活性 基因克隆 浓度梯度 诱导表达 PAGE 印迹杂交 blot 融合蛋白 试验检测 细胞毒性 培养基 电转化 转化子 高抗性 抗生素
文章编号:1005-4545(2005)03-0289-04
修稿时间:2004-01-03

Secretive Expression of Porcine IFN-α in Yeast Pichia pastoris
Ge Li,LI Zhen,YU Rui-song,LIU Hui-li,ZHANG De-fu,ZHOU Zhi-ai,YIN Xun-he. Secretive Expression of Porcine IFN-α in Yeast Pichia pastoris[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2005, 25(3): 289-292
Authors:Ge Li  LI Zhen  YU Rui-song  LIU Hui-li  ZHANG De-fu  ZHOU Zhi-ai  YIN Xun-he
Affiliation:GE Li~1,3,LI Zhen~1,2*,YU Rui-song~1,2,LIU Hui-li~1,2,ZHANG De-fu~1,2,ZHOU Zhi-ai~1,2,YIN Xun-he3
Abstract:
Keywords:porcine interferon  Pichia pastoris  expression
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