| 内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1，4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析 |
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| 引用本文： | 范晓静,邱思鑫,胡方平.内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1，4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析[J].热带作物学报,2008,29(4):443-449. |
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| 作者姓名： | 范晓静 邱思鑫 胡方平 |
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| 作者单位： | 1. 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州,350002;福建农林大学生命科学学院,福州,350002
2. 福建省农科院蔬菜研究中心,福州,350013
3. 福建农林大学植物保护学院,福州,350002 |
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| 摘 要： | 以内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株基因组为模板,克隆了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶基因的ORF.测序结果表明该ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸,分子量为55．07ku,等电点为7．83.Blast同源性分析结果表明,该序列与GenBank登录的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis M28332)纤维素酶核苷酸序列的同源性最高(98％),其氨基酸同源性也达98％,已被GenBank收录(Accession number).用BamH I和Xho I双酶切目的片段和表达载体pET-29a( )后相连接,构建重组表达载体pET-glu,并导入BL21细菌中表达.酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在59 ku左右有融合蛋白带,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6．4,为中性纤维素酶.实验结果为进一步研究内生解淀粉芽孢杆菌TB2纤维素酶的功能和应用打下了基础.
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| 关 键 词： | 内生解淀粉芽孢杆菌 B-1 4-内切葡聚糖酶基因 克隆 大肠杆菌表达 |
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