| 齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用 |
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| 引用本文： | 章颉,孟春梅,荣松,张超,洪健,吴建祥. 齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用[J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2010, 36(4): 375-380. DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2010.04.004 |
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| 作者姓名： | 章颉 孟春梅 荣松 张超 洪健 吴建祥 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,农业与生物技术学院,生物技术研究所,浙江,杭州310029
2. 浙江传化生物技术有限公司,浙江,杭州,311231 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，杭州市重大科技创新专项资助项目 |
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| 摘 要： | 齿兰环斑病毒(Odontoglossumringspot virus,ORSV)是感染兰花的主要病毒之一.用RT-PCR方法从感染ORSV兰花中克隆到该病毒的477 bp外壳蛋白基因(CP),外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建重组原核表达载体pET-32a-CP;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化获得分子量约为37 ku含硫氧还蛋白的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备ORSV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多抗建立了可靠、灵敏、特异的检测ORSV的免疫捕获RT-PCR及dot-blot ELISA方法,为该兰花病毒病的诊断、兰花抗病育种和脱毒苗的建立打下了基础.
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| 关 键 词： | 齿兰环斑病毒 原核表达 多克隆抗体 免疫捕获RT-PCR |
Prokaryotic expression of the coat protein gene of Odontoglossum ringspot virus,preparation and application of its polyclonal antibodies |
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| ZHANG Jie,MENG Chun-mei,RONG Song,ZHANG Chao,HONG Jian,WU Jian-xiang. Prokaryotic expression of the coat protein gene of Odontoglossum ringspot virus,preparation and application of its polyclonal antibodies[J]. Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences), 2010, 36(4): 375-380. DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2010.04.004 |
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| Authors: | ZHANG Jie MENG Chun-mei RONG Song ZHANG Chao HONG Jian WU Jian-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dot-blot ELISA |
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