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| 鹅IGF-I基因cDNA的克隆、分析与原核表达 | |
| 作者姓名： | 王雷 王宝维 贾晓晖 杨志刚 刘光磊 |
| 摘 要： | 从GenBank中读取鸡、鸭、鹌鹑、火鸡等的胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因序列进行分析并设计引物,运用RT-PCR法从五龙鹅的总RNA中克隆了IGF-I基因的完整编码区序列(GenBank登录号为DQ662932).运用生物信息学技术对序列进行分析,结果显示:五龙鹅JGF-I基因的编码区长462 bp,与鸭和鸡基因序列同源性分别为99.6%和98.1%;分子进化树进一步揭示了五龙鹅与鸭、鸡及其他动物的进化关系;同源建模分析发现该基因有3个α-螺旋组成.克隆鹅IGF-I基因表达序列,然后连接到pET-32a载体上进行原核表达.经SDS-PAGE分析发现原核表达产物约为28 ku的融合蛋白,Western杂交分析表明,重组蛋白为目的蛋白. |
| 关 键 词： | IGF-I 原核表达 同源建模 五龙鹅 基因 克隆 分析表 原核表达 Cloning Molecular Goose Expression Analyzing cDNA Sequence 重组蛋白 杂交 Western 融合蛋白 载体 后连接 表达序列 组成 螺旋 发现 |
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