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斑节对虾cyclin H基因的原核表达和蛋白纯化
引用本文:郭 松,傅明骏,赵 超,等.斑节对虾cyclin H基因的原核表达和蛋白纯化[J].广东农业科学,2015,42(3):125-130.
作者姓名:郭 松  傅明骏  赵 超  
作者单位:1. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
2. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300;农业部南海渔业资源开发利用重点实验室,广东广州510300
基金项目:国家自然科学基金,国家现代农业产业技术体系建设专项,广东省海洋渔业科技推广专项,广东省科技计划项目,海南省应用技术研发与示范推广专项,海南省自然科学基金,中央级公益性科研院所基本科研业务费专项
摘    要:cyclin H是细胞分裂周期调控中的重要因子,研究斑节对虾cyclin H对阐明斑节对虾卵巢发育机制有重要意义。构建了斑节对虾cyclin H的重组表达质粒p ET21a/cyclin H,利用原核表达技术进行诱导表达获得目的蛋白,并用亲和层析技术进行纯化,用SDS-PAGE、Western blot和质谱联用分析诱导和纯化结果。结果表明,斑节对虾cyclin H重组蛋白获得了表达,纯化的蛋白经鉴定为cyclin H重组蛋白;在22℃和37℃培养条件下,重组蛋白在LA和YTGA两种培养基上均能被诱导表达;22℃条件下,部分融合蛋白为可溶性表达;在37℃培养条件下LA培养基获得较好的效果,且均以包涵体形式存在。

关 键 词:斑节对虾  细胞周期蛋白H  原核表达

Prokaryotic expression and protein purification of cyclin H in giant tiger shrimp Penaeus monodon
GUO Song;FU Ming-jun;ZHAO Chao;JIANG Shi-gui;YANG Qi-bin;PENG Chao;LI Wei-jie;QIU Li-hua.Prokaryotic expression and protein purification of cyclin H in giant tiger shrimp Penaeus monodon[J].Guangdong Agricultural Sciences,2015,42(3):125-130.
Authors:GUO Song;FU Ming-jun;ZHAO Chao;JIANG Shi-gui;YANG Qi-bin;PENG Chao;LI Wei-jie;QIU Li-hua
Institution:GUO Song;FU Ming-jun;ZHAO Chao;JIANG Shi-gui;YANG Qi-bin;PENG Chao;LI Wei-jie;QIU Li-hua;South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences;College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University;Key Laboratory of South China Sea Fishery Resources Exploitation & Utilization Ministry of Agriculture;
Abstract:
Keywords:Penaeus monodon  cyclin H  prokaryotic expression
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