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| 从小鼠17.5d胚胎cDNA文库中筛选Bax相互作用蛋白 | |
| 引用本文： | 孙小军,王银银,戚华兵,李 军,罗 军,常智杰. 从小鼠17.5d胚胎cDNA文库中筛选Bax相互作用蛋白[J]. 西北农业学报, 2010, 19(3): 21-25 |
| 作者姓名： | 孙小军 王银银 戚华兵 李 军 罗 军 常智杰 |
| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西杨凌,712100 2. 清华大学,医学院,北京,100084 3. 中国人民解放军第三军医大学,重庆,400042 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金香港合作项目 |
| 摘 要： | 为了研究Bax可能形成的在细胞凋亡中起作用的蛋白复合体,选择Bcl-2家族中的前凋亡因子Bax作为诱饵蛋白,对17.5 d小鼠cDNA文库进行酵母双杂交筛选和BLAST,找到1个RACK1蛋白。为进一步验证上述酵母中Bax与RACK1的结合,用Bax与RACK1的真核表达载体,以免疫共沉淀和免疫荧光染色验证其相互作用。利用293T细胞过量表达Bax和RACK1蛋白,收获裂解液后进行免疫共沉淀试验,结果表明,Bax和RACK1在体内仍可形成复合体;在293T细胞中共转Bax和RACK1质粒,用各自荧光抗体标记,然后用激光共聚焦显微镜观察,发现Bax和RACK1可以共定位。 |
| 关 键 词： | 酵母双杂交 |
| 收稿时间： | 2009-05-25 |
| 修稿时间： | 2009-09-20 |
Screening Bax Interaction Proteins from 17.5 d Embryo Mouse cDNA Library |
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| SUN Xiaojun,WANG Yinyin,QI Huabing,LI Jun,LUO Jun and CHANG Zhijie. Screening Bax Interaction Proteins from 17.5 d Embryo Mouse cDNA Library[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2010, 19(3): 21-25 | |
| Authors: | SUN Xiaojun WANG Yinyin QI Huabing LI Jun LUO Jun CHANG Zhijie |
| Affiliation: | SUN Xiaojun1,WANG Yinyin2,QI Huabing3,LI Jun1,LUO Jun1 , CHANG Zhijie2(1.College of Animal Science , Technology,Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China,2.Medical School,Tsinghua Universtiy,Beijing 100084,3.Third Military Medical University,Chongqing 400042,China) |
| Abstract: | In order to study the formation of Bax protein complex which may play a role in apoptosis protein complex,we use the full length Bax as bait protein to screen 17.5 d embryo mouse cDNA library in GAL4 Yeast two hybrid system and a RACK1 protein was conferred.Interaction of Bax and RACK1 was validated in the eukaryotic expression vector with co-immunoprecipitation and immunofluorescence staining.Using 293T cells,overexpression lysates of Bax and RACK1 protein were harvested and co-immunoprecipitation experime... |
| Keywords: | Bax RACK1 Bax RACK1 Yeast two-hybrid system |
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