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甘蔗蔗糖转运蛋白SoSUT5基因克隆、表达及功能鉴定
引用本文:牛俊奇,苗小荣,王道波,杨丽涛,李杨瑞. 甘蔗蔗糖转运蛋白SoSUT5基因克隆、表达及功能鉴定[J]. 南方农业学报, 2018, 49(10): 1917-1923. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2018.10.03
作者姓名:牛俊奇  苗小荣  王道波  杨丽涛  李杨瑞
作者单位:玉林师范学院 生物与制药学院,广西 玉林 537000广西农产资源化学与生物技术重点实验室,广西 玉林 537000广西大学 农学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁 530004玉林师范学院 生物与制药学院,广西 玉林,537000中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院 甘蔗研究所,南宁 530007
摘    要:[目的]克隆甘蔗蔗糖转运蛋白基因SoSUT5,分析其表达特性,并通过转化酵母突变体验证其功能,为研究SUT5基因的功能提供理论依据.[方法]以甘蔗品种桂糖28(GT28)未成熟茎cDNA为模板,采用RT-PCR从甘蔗中克隆SoSUT5基因,并进行生物信息学分析及构建系统发育进化树.采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SoSUT5基因在甘蔗不同组织的表达情况,同时构建酵母表达载体并转化酵母突变体SUSY7/ura3进行基因功能验证.[结果]克隆获得的SoSUT5基因为1605 bp,编码534个氨基酸,GenBank登录号KF808328.SoSUT5蛋白的分子量和理论等电点(pI)分别为56.40 kD和8.36,具有12个跨膜结构,属于易化扩散载体(MFS)家族成员,也属于蔗糖/H+共转运体家族(GPH)成员.该蛋白具有保守的SUT蛋白功能域,是SUT5亚家族成员.在甘蔗生理成熟期,从成熟茎、花序、成熟芽和根中均能检测到SoSUT5基因表达,以在花序中的表达量最高,根次之,但在+1叶中检测不到.转pDR196空载体的酵母突变体SUSY7/ura3在以蔗糖为唯一碳源的MD培养基上不能生长,但转pDR-SoSUT5重组质粒的酵母突变体SUSY7/ura3能正常生长,说明SoSUT5蛋白具有蔗糖转运活性.[结论]SoSUT5基因编码蛋白具有转运蔗糖的生物学功能,在甘蔗蔗糖运输和积累过程中发挥调控作用.

关 键 词:甘蔗   蔗糖转运蛋白(SUT)   基因克隆   表达分析   生物信息学分析

Cloning,expression and functional identification of sucrose transporter gene(SoSUT5)in sugarcane
NIU Jun-qi,MIAO Xiao-rong,WANG Dao-bo,YANG Li-tao,LI Yang-rui. Cloning,expression and functional identification of sucrose transporter gene(SoSUT5)in sugarcane[J]. Journal of Southern Agriculture, 2018, 49(10): 1917-1923. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2018.10.03
Authors:NIU Jun-qi  MIAO Xiao-rong  WANG Dao-bo  YANG Li-tao  LI Yang-rui
Abstract:
Keywords:
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