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绿色荧光蛋白基因银耳表达载体构建及表达
引用本文:孙淑静,郑域茹,谢宝贵,游 凯,胡方平. 绿色荧光蛋白基因银耳表达载体构建及表达[J]. 勤云标准版测试, 2008, 0(4)
作者姓名:孙淑静  郑域茹  谢宝贵  游 凯  胡方平
作者单位:[1]福建农林大学菌物研究中心,福州350002 [2]福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州350002
基金项目:卫生部资助项目 , 国家自然科学基金
摘    要:以银耳芽孢为材料,由载体pEGFP、pCAMBIA1300经过HindIII和EcoRⅠ双酶切、连接、转化,重组质粒酶切验证,成功构建了由双孢蘑菇gpd启动子调控EGFP基因的银耳真核表达载体,命名pCB-BEGFP。采用电击转化法将携带EGFP基因的银耳表达载体pCB-BEGFP转化到银耳芽孢。提取4个转化子基因组DNA,用EGFP基因特异引物PCR扩增,电泳结果表明有与EGFP基因大小一致的特异带出现;荧光显微镜观察在再生培养基上的转化子可看到很强的绿光;其中一个转化子蛋白SDS-PAGE电泳,结果发现在大约27kD处有一明显的蛋白条带出现,与预期的蛋白分子量相近。以上结果证明EGFP基因转入银耳芽孢中,双孢蘑菇启动子可以调控外源基因的在银耳芽孢中正确表达。

关 键 词:银耳  绿色荧光蛋白基因  表达  绿色荧光  蛋白基因  银耳  表达载体  构建及表达  Gene  EGFP  Expression Vector  正确表达  外源基因  调控  启动  基因转入  蛋白分子量  预期  白条  发现  绿光  培养基  再生

Construction of Tremella fuciformis Expression Vector and Expression of EGFP Gene
Sun Shujing,Zheng Yuru,Xie Baogui,You Kai,Hu Fangping. Construction of Tremella fuciformis Expression Vector and Expression of EGFP Gene[J]. , 2008, 0(4)
Authors:Sun Shujing  Zheng Yuru  Xie Baogui  You Kai  Hu Fangping
Affiliation:Mycological Research Center, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002;
Key Laboratory of Biopesticide and Chemical Biology, Ministry of Education, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002
Abstract:
Keywords:Tremella fuciformiszz  EGFP genezz  expressionzz
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