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| 猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点的克隆及原核表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 张春叶,沈 红,张 莉,李焕荣,路 苹. 猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点的克隆及原核表达载体的构建[J]. 勤云标准版测试, 2008, 0(7) |
| 作者姓名： | 张春叶 沈 红 张 莉 李焕荣 路 苹 |
| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术系，北京 102206；农业应用新技术北京市重点实验室，北京 102206； 北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京 100097 ; |
| 摘 要： | 【研究目的】对猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点进行克隆和原核表达载体的构建。【方法】参考GenBank上公布的TGEV S基因A抗原位点序列，应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物，用于RT-PCR扩增A抗原位点目的片段，将扩增产物连接于paesy-T克隆载体上构建克隆载体，用EcoR I和Xhol I对表达载体PET-32a（+）和重组质粒进行酶切，将酶切产物亚克隆至PET-32a（+）多克隆位点上，连接、转化至BL21(DE3)，构建A位点的原核表达载体，并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。【结果】所扩增的目的片段的大小为534bp，与原核表达载体连接后，经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明，该基因与其它猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性，说明成功地构建了TGEV S 基因A抗原位点的原核表达载体。【结论】TGEV S 基因A抗原位点原核表达载体的成功构建，填补了中国国内单独针对此位点进行研究的空白，也为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。 |
| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒；S基因A抗原位点；克隆；原核表达载体的构建 |
Cloning and the Construction of Prokaryotic Expression of the Site A of S Gene of Transmissible Gastroenteritis Virus |
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| Zhang Chunye,Shen Hong,Zhang Li,Li Huanrong,Lu Ping. Cloning and the Construction of Prokaryotic Expression of the Site A of S Gene of Transmissible Gastroenteritis Virus[J]. , 2008, 0(7) | |
| Authors: | Zhang Chunye Shen Hong Zhang Li Li Huanrong Lu Ping |
| Affiliation: | Department of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206; Key Laboratory of New Technology of Agricultural Application, Beijing 102206; Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Beijing Academy of A |
| Abstract: | |
| Keywords: | swine transmissible gastroenteritis viruszz the A antigenic site of S genezz cloningzz construction of prokaryotic expressionzz |
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