的克隆及表达分析

 逆境对于水稻产量和品质有很大影响，研究在逆境下水稻基因的表达变化对于研究水稻抗逆有着重要意义。该实验运用荧光差异显示(Fluorescence Differential Display, FDD)技术，从低温处理的水稻中克隆到OsRAN1基因并通过半定量PT-PCR分析该基因在低温和高盐逆境下的表达。该基因cDNA序列全长为984bp，含有一个编码221个氨基酸残基的开放阅读框，推测分子量为25.0 KD，此氨基酸序列具有GTPase活性区域，属于小G蛋白Ran亚家族，通过氨基酸相似性比对发现，Ran家族氨基酸序列高度保守，OsRAN1与TaRAN1和AtRAN1相似性分别达到98.19%和92.76%。通过半定量PT-PCR分析，发现在低温胁迫下，OsRAN1在根和叶鞘中表达量均有增加，尤其是高盐胁迫下根中OsRAN1表达量有迅速升高然后降低的变化。推测该基因在水稻逆境应答中起着重要作用。