| 柑橘溃疡病菌EMA-PCR快速活体检测技术的建立 |
| |
| 引用本文： | 熊书,王中康,卢小林,殷幼平. 柑橘溃疡病菌EMA-PCR快速活体检测技术的建立[J]. 植物保护, 2013, 39(4): 78-84 |
| |
| 作者姓名： | 熊书 王中康 卢小林 殷幼平 |
| |
| 作者单位： | 重庆大学生命科学学院,重庆,400030 |
| |
| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项，中央高校基本科研业务费 |
| |
| 摘 要： | 传统PCR方法不能诊断柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri Gabriel)的死活状态,往往导致假阳性检测结果.本研究将特异性核酸染料叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术结合,旨在建立柑橘溃疡病活菌的快速检测技术.根据柑橘溃疡病菌独有的保守蛋白基因设计特异性引物扩增出278 bp的靶带,PCR反应的检测下限为25个细胞/25 μL或2.75 pg/25 μL.EMA-PCR结果表明:当卤钨灯曝光时间1 min,EMA终浓度为1.0 mg/L时,能有效抑制1.0×108 cfu/mL死菌的扩增；当EMA的浓度小于30 mg/L时,EMA对上述相同浓度活菌靶基因的扩增没有明显的抑制.EMA-PCR对死活混合菌的扩增表明,活菌数在6.875×101～6.875×105 cfu/PCR范围时,荧光强度与混合体系中活菌的对数值有线性关系.基于以上建立的EMA-PCR活体检测技术,对疑似带病柑橘材料进行检测,结果发现能降低柑橘溃疡病菌检测过程中的假阳性,有望为柑橘溃疡病的检疫检验提供更科学的技术手段.
|
| 关 键 词： | 柑橘溃疡病菌 EMA-PCR 死菌与活菌 检疫 |
Establishment of EMA-PCR detection method of viable cells of Xanthomonas citri subsp.citri |
| |
| Xiong Shu,Wang Zhongkang,Lu Xiaolin,Yin Youping. Establishment of EMA-PCR detection method of viable cells of Xanthomonas citri subsp.citri[J]. Plant Protection, 2013, 39(4): 78-84 |
| |
| Authors: | Xiong Shu Wang Zhongkang Lu Xiaolin Yin Youping |
| |
| Affiliation: | College of Life Sciences, Chongqing University, Chongqing400030, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Xanthomonas citri subsp. citri EMA-PCR viable and dead bacteria quarantine |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《植物保护》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《植物保护》下载全文 |
|
