烟草硼内向转运体NIP5;1的克隆和表达分析

为研究烟草中的硼转运机制,克隆了烟草硼内向转运体基因,并分析其表达特点。采用生物信息学的方法预测烟草硼内向转运体的开放阅读框,并通过PCR的方式克隆后测序验证;其相应蛋白质的结构特点亦用生物信息学手段分析。该基因在烟草不同组织和对不同处理响应的表达差异采用半定量RT-PCR的方法检测。结果显示克隆到烟草硼内向转运体Nt NIP5;1的开放阅读框,全长894 bp,编码297个氨基酸,具有MIP家族典型的结构域HLNPSLTIA,Gen Bank登录号为KF611892。其蛋白质的二级结构以α-螺旋为主,有5个跨膜结构域。RT-PCR结果发现,Nt NIP5;1在根和叶中均有表达,但在叶中表达水平较高;6-BA、SA和ABA均可抑制其表达。