| 传染性喉气管炎病毒河南株gB基因的克隆、序列分析及其真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 廖仲磊,陈红英,李新生. 传染性喉气管炎病毒河南株gB基因的克隆、序列分析及其真核表达载体的构建[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2008, 36(10): 29-33 |
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| 作者姓名： | 廖仲磊 陈红英 李新生 |
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| 作者单位： | [1]南京农业大学兽医学院,江苏南京210095 [2]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002 |
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| 摘 要： | 【目的】构建传染性喉气管炎病毒(ILTV)的真核表达载体。【方法】从传染性喉气管炎病毒河南株(ILTV-XY)感染的鸡胚绒毛尿囊膜中提取病毒DNA,进行PCR扩增,PCR产物进行T-A克隆与测序,获得了鸡IL-TV-XYgB全基因序列;对ILTV-XY株gB基因与GenBank中读取的5株ILTVgB基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行了比较分析;并将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,对构建的重组质粒pcDNA3.1/gB进行酶切、测序鉴定。【结果】序列测定表明,gB全基因核苷酸长度为2 629 bp,编码873个氨基酸,推导氨基酸序列有8个潜在的N-糖基化位点,有12个与二硫键形成有关的半胱氨酸。与GenBank中读取的澳大利亚SA2疫苗株、辽宁疫苗株、烟台株、美国632强毒株、英国Throne强毒株gB基因进行比较,核苷酸序列同源性为99%以上,与ILTV-SA2株gB基因比较发现,ILTV-XY株gB基因核苷酸序列在第89位均缺失1个碱基G,而在第102位又都插入1个碱基A,从而引起该毒株gB基因推导的氨基酸序列中第28~32位5个氨基酸的移码突变。构建的重组质粒pcD-NA3.1/gB经酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。【结论】成功构建了ILTV的真核表达质粒pcDNA3.1/gB,为ILTV核酸疫苗的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 传染性喉气管炎病毒 gB基因 聚合酶链反应 序列分析 真核表达载体 |
| 收稿时间： | 2008-04-08 |
Gene cloning,sequence analysis and eukaryotic expression vector construction of gB gene of chicken infectious laryngotracheitis virus Henna isolate |
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| LIAO Zhong-lei,CHEN Hong-ying,LI Xin-sheng,CUI Bao-an,LI Xiang-rui. Gene cloning,sequence analysis and eukaryotic expression vector construction of gB gene of chicken infectious laryngotracheitis virus Henna isolate[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2008, 36(10): 29-33 |
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| Authors: | LIAO Zhong-lei CHEN Hong-ying LI Xin-sheng CUI Bao-an LI Xiang-rui |
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| Affiliation: | 1 (1 College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing,Jiangsu 210095,China;2 College of Animal Husbandry and Veterinary,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002,China) |
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| Abstract: | |
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