| 重组脱乙酰基酶在大肠杆菌中的表达及活性检测 |
| |
| 引用本文： | 武传菊,王寅,张大伟.重组脱乙酰基酶在大肠杆菌中的表达及活性检测[J].饲料工业,2012,33(4):47-49. |
| |
| 作者姓名： | 武传菊 王寅 张大伟 |
| |
| 作者单位： | 1. 山东轻工业学院,山东省微生物工程重点实验室,250353,山东省济南市
2. 山东省计量研究院
3. 青岛根源生物集团研发中心 |
| |
| 摘 要： | NodB是来源于根瘤菌的脱乙酰基酶,可水解脱去几丁寡糖非还原端糖基的乙酰基。试验将体外合成的重组nodBNX和nodBBX基因,分别插入质粒pET-28a的lac启动子的下游,构建了可以表达融合蛋白NodB1(T7-tag+NodB+His-tag)和NodB2(NodB+His-tag)的重组大肠杆菌pET-NodB-NX和pET-NodBBX,在0.1 mM IPTG诱导下,两种重组菌均可表达目的蛋白NodB1和NodB2,分子量分别为30 kD和26 kD,经包含体复性、Ni柱亲和层析得到NodB纯化产物,以重组NodB催化几丁五糖的脱乙酰基反应,酶解产物通过薄层层析和ESI-MS检测。试验结果表明:融合蛋白NodB1和NodB2均具有转乙酰基活性,但NodB2活性大于NodB1。
|
| 关 键 词： | 脱乙酰基酶 融合蛋白 重组大肠杆菌 薄层层析 ESI-MS |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
