| 猪甲状腺激素应答基因SPOT14(THRSP)的原核表达及其融合蛋白的亲和纯化 |
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| 引用本文： | 王丛梅,郭豫杰,李宏基,韩立强,李奎,杨国宇.猪甲状腺激素应答基因SPOT14(THRSP)的原核表达及其融合蛋白的亲和纯化[J].农业生物技术学报,2012,20(8):901-906. |
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| 作者姓名： | 王丛梅 郭豫杰 李宏基 韩立强 李奎 杨国宇 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放试验室,郑州,450002
2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 |
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| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育重大专项，农业部948重点项目 |
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| 摘 要： | 甲状腺激素应答基因（thyroidhormone responsive SPOT14,THRSP）是受甲状腺激素诱导表达的核内基因,参与脂肪合成代谢途径限速酶的转录调控,对动物脂肪生成具有重要的调控作用。为进一步研究猪SPOT14基因所编码蛋白质的生物学功能,本实验将猪SPOT14（GenBank登录号:JF951726）的ORF片段与表达载体pET-28α（+）进行重组,获得的重组子pET-28α（+）-S14,转化大肠杆菌（Escherichia coli）BL2l（DE3）感受态细胞,重组菌经IPTG诱导,通过SDS-PAGE分析显示,目的蛋白分子量约为20.91kD,且主要以包涵体形式存在,最佳诱导条件是37℃1mmol/LIPTG诱导5h。将获得的包涵体用6xHisNi-NTA纯化柱纯化后,采用Western blot进一步检测到了21kD目的蛋白的表达。重组质粒pET-28α（+）-S14在大肠杆菌BL21（DE3）中成功地得到了表达,不仅为SPOT14基因生物学功能的研究,而且为进一步研究S14蛋白功能,了解脂肪代谢调控机制提供了基础资料。
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| 关 键 词： | 猪 SPOT14 原核表达 纯化 |
Prokaryotic Expression of Porcine Thyroid Hormone Responsive SPOT14 Gene(THRSP) and Affinity Purification of Its Fused Protein |
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| WANG Cong-Mei
,
GUO Yu-Jie
,
LI Hong-Ji
,
HAN Li-Qiang
,
LI Kui
,
YANG Guo-Yu.Prokaryotic Expression of Porcine Thyroid Hormone Responsive SPOT14 Gene(THRSP) and Affinity Purification of Its Fused Protein[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2012,20(8):901-906. |
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| Authors: | WANG Cong-Mei GUO Yu-Jie LI Hong-Ji HAN Li-Qiang LI Kui YANG Guo-Yu |
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| Institution: | 1* 1 Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition, Ministry of Agriculture, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China; 2 Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pig SPOT14 Prokaryotic expression Purification |
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