| 片球菌素基因的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 韩烨,周志江,王培培,张丽霞.片球菌素基因的克隆及表达[J].华北农学报,2009,24(2). |
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| 作者姓名： | 韩烨 周志江 王培培 张丽霞 |
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| 作者单位： | 天津大学,农业与生物工程学院食品科学系,天津,300072 |
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| 摘 要： | 从乳酸片球菌中提取质粒DNA作为模板,根据GeneBank公布的细菌素结构基因,设计一对特异性引物,进行PCR扩增片段,将该片段定向克隆到pTA2载体,测序,与发表的基因序列比较,同源性为100%,然后克隆到表达载体Pet-28a,转化到Escherichia coli DH5α,经过卡那霉素平皿筛选,质粒酶切,PCR两步验证,获得阳性重组质粒,并转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,以异丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳,显示在4 600 Da处出现条带,与已报道的细菌素分子量大小符合.表达产物对单核细胞增多症李氏杆菌有抗菌作用.
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| 关 键 词： | 乳酸片球菌 克隆 原核表达 |
Cloning and Expression of Pediocin Gene |
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| HAN Ye,ZHOU Zhi-jiang,WANG Pei-pei,ZHANG Li-xia.Cloning and Expression of Pediocin Gene[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2009,24(2). |
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| Authors: | HAN Ye ZHOU Zhi-jiang WANG Pei-pei ZHANG Li-xia |
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| Institution: | College of Agriculture and Bioengineering;Tianjin University;Tianjin 300072;China |
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| Keywords: | PCR |
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