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方正银鲫微卫星序列的筛选及PCR扩增产物的初步检测
引用本文:贾智英,梁利群,孙效文. 方正银鲫微卫星序列的筛选及PCR扩增产物的初步检测[J]. 中国水产科学, 2006, 13(6): 990-994
作者姓名:贾智英  梁利群  孙效文
作者单位:1. 中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类生物工程育种重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150070;上海水产大学,生命科学与技术学院,上海,200090
2. 中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类生物工程育种重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150070
摘    要:采用小片段克隆法构建了方正银鲫[(Carassius auratus gibelio(Block)]部分基因组文库,并采用非影印的方法将转化子转移到硝酸纤维素滤膜上。用人工合成、并经放射性同位素[γ-^32P]ATP标记的(CA)15探针对构建的基因组文库进行筛选,获得137个阳性克隆,经测序得到微卫星序列130个,其中完美型、非完美型、混合型分别占64.3%、16.9%和18.8%。应用引物设计软件Primer Prmmer5.0进行引物设计,得到引物103对。合成30对引物,随机选取其中5对进行PCR扩增。结果表明,这5对引物均可以稳定扩增,并且观测杂合度均较高。

关 键 词:雌核发育  银鲫  微卫星DNA
文章编号:1005-8737-(2006)06-0990-05
收稿时间:2005-02-25
修稿时间:2006-03-31

Isolation of microsatellites in Fangzheng silver crucian carp (Carassius auratus gibelio(Block) )and preliminary detection of PCR products
JIA Zhi-ying,LIANG Li-qun,SUN Xiao-wen. Isolation of microsatellites in Fangzheng silver crucian carp (Carassius auratus gibelio(Block) )and preliminary detection of PCR products[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2006, 13(6): 990-994
Authors:JIA Zhi-ying  LIANG Li-qun  SUN Xiao-wen
Affiliation:1. Heilongjiang River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China; 2. College of Aqulife Sciences and Technology, Shanghai Fisheries university, Shanghai 200090, China
Abstract:
Keywords:gynogenetic    Carassius auratus gibelio    microsatellite DNA
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