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镉胁迫下构树qRT-PCR内参基因筛选及验证
引用本文:李红英,陈萌笛,王政博,郝自远,刘龙昌,赵西平,倪建伟.镉胁迫下构树qRT-PCR内参基因筛选及验证[J].林业科学研究,2023(4):129-138.
作者姓名:李红英  陈萌笛  王政博  郝自远  刘龙昌  赵西平  倪建伟
作者单位:1. 河南科技大学园艺与植物保护学院;2. 国家林业和草原局国家公园(自然保护地)发展中心
摘    要:目的]筛选出镉(Cd)胁迫下构树中稳定表达的内参基因,为后续开展构树耐Cd的分子机理研究奠定基础。方法]以Cd胁迫下构树的根和叶组织为材料,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测10个候选基因(BpUBE2、 BpRPL8、 Bp Actin、 BpGAPDH、 BpHSP、 BpTUA、 BpDOUB、 Bpβ-TUB、 BpHIS、BpNADH)的表达情况,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder分析软件对候选内参基因的表达稳定性进行综合评估,并通过逆境胁迫响应基因BpDREB验证筛选出的内参基因的稳定性。结果]BpDOUB和BpNADH在Cd胁迫下构树中基因表达相对稳定,BpGAPDH表达稳定性最差。以BpDREB验证内参稳定性时发现,单独或组合使用BpDOUB及BpNADH为内参基因时,BpDREB基因表达水平显示出相似的趋势,而稳定性较差的BpGAPDH基因未能对BpDREB的表达量进行准确校正。结论]BpDOUB、BpNADH基因以及Bp DOUB+BpNADH基因组合均可作为合适的内参基因,提高Cd胁迫下构树相关基因表...

关 键 词:构树  内参基因  Cd胁迫  荧光定量PCR
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