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西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达
引用本文:王 慧,罗 军,胡仕良.西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(8):24-30.
作者姓名:王 慧  罗 军  胡仕良
作者单位:西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室
基金项目:国家转基因生物新品种培育项目(2009ZX08009-162B);陕西省重大科技创新项目(2009ZKC07-01-1);公益性行业(农业)科研专项(201103038)
摘    要:【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。

关 键 词:西农萨能奶山羊  胰岛素诱导基因1  实时荧光定量PCR  序列分析  组织表达
收稿时间:2012/10/19 0:00:00

Cloning,sequence characters and tissue expression pattern of INSIG-1 in Saanen Dairy Goat
WANG Hui,LUO Jun,HU Shi-liang,XI Li-meng,ZHANG Li-ping,LI Fang,SUN Yu-ting.Cloning,sequence characters and tissue expression pattern of INSIG-1 in Saanen Dairy Goat[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(8):24-30.
Authors:WANG Hui  LUO Jun  HU Shi-liang  XI Li-meng  ZHANG Li-ping  LI Fang  SUN Yu-ting
Institution:(College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University;Shaanxi Provincial Key Laboratory of Agricultural Molecular Biology,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Xinong Saanen Dairy Goat  INSIG-1  RT-qPCR  sequence characters  tissue expression
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