版纳微型猪近交系B4GALNT2基因真核表达载体构建及亚细胞定位分析 |
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引用本文: | 王淑燕,宋雪,王配,霍海龙,张霞,张永云,李罗刚,王雪飞,霍金龙.版纳微型猪近交系B4GALNT2基因真核表达载体构建及亚细胞定位分析[J].四川农业大学学报,2019(2):215-220. |
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作者姓名: | 王淑燕 宋雪 王配 霍海龙 张霞 张永云 李罗刚 王雪飞 霍金龙 |
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作者单位: | 云南农业大学动物科学技术学院/云南省版纳微型猪近交系重点实验室;云南农业职业技术学院教务处;云南农业大学农科专业基础实验教学示范中心 |
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摘 要: | 【目的】研究异种器官移植免疫排斥相关基因B4GALNT2的亚细胞定位情况。【方法】以版纳微型猪近交系(BMI)为试验对象,通过RT-PCR方法获得B4GALNT2基因cDNA序列,运用分子克隆技术构建B4GALNT2和报告基因EGFP的重组真核表达载体pEGFP-C1-B4GALNT2,将其转染猪肾上皮细胞PK15进行瞬时表达,同时用Mito Tracker和Hoechst33342荧光染料分别对线粒体和细胞核染色,通过EGFP示踪检测B4GALNT2在PK15细胞中的表达和定位。【结果】成功构建了BMI B4GALNT2基因的绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1-B4GALNT2,转染PK15细胞后主要在细胞质中检测到绿色荧光蛋白的表达,试验结果与PSORTⅡserver网站的预测一致。【结论】B4GALNT2蛋白主要定位于细胞质,揭示该蛋白主要在细胞质中发挥其功能作用。
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关 键 词: | 版纳微型猪近交系 β1 4-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(B4GALNT2) Sda抗原 真核表达 亚细胞定位 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector and Subcellular Localization Analysis of B4GALNT2 Gene in Banna Mini-Pig Inbred Line |
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