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鸡胚酶解多肽制备及其在HDF-α细胞培养中的初步应用
作者姓名:耿威  李杨  战铁楠  耿晓宇  王莉红  迟春萍
作者单位:长春园生肽生物科技有限公司,吉林长春 130062;吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,生命科学学院,吉林长春 130012;吉林省正合生物技术有限责任公司,吉林长春 130052;长春生物制品研究所有限公司,吉林长春 130062
摘    要:目的:研究制备的鸡胚酶解多肽原液对人真皮成纤维细胞HDF-α的增殖、抗紫外及抗氧作用。方法:将鸡胚去壳、匀浆,破碎细胞;经胰酶酶解后,离心收集上清液,超滤截留分子量小于50 kDa的组分,除菌过滤后为多肽原液;原液进行理化及活性检测,用MTT比色法测定酶解多肽促进上皮细胞增殖,活性氧ROS检测法测定酶解多肽保护细胞抗紫外及抗氧化作用。结果:原液经shotgun分析为来自70种不同蛋白的300余种肽段,含量16 mg/mL,收率91.1%,pH 6.82±0.05,渗透压286 mmol/L,微生物限度检查及细菌内毒素检查合格;鸡胚酶解多肽促HDF-α细胞增殖率为20%~40%,抗紫外效果具有量-效关系,多肽浓度为250 μg/mL时抗紫外保护率约100%,100 μg/mL多肽抗自由基效率高达77%。结论:提取的鸡胚的多肽具有良好的促进HDF-α细胞增殖、抗紫外及抗氧化的细胞保护和促进损伤修复的作用,为鸡胚酶解多肽在HDF-α细胞培养中的作用提供了理论依据。

关 键 词:鸡胚  多肽  细胞培养  抗氧化  抗紫外
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