兰州大尾羊H-FABP基因荧光定量PCR检测方法的研究

通过对兰州大尾羊尾部、大网膜、肝脏、肾周脂肪组织中的总RNA提取，反转录获得总cDNA样品，结合PCR技术，建立了SYBR荧光定量PCR法检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因mRNA在不同组织中相对表达量的试验方法，并进行批内、批间重复性检验。结果表明，H-FABP和18S基因标准曲线回归方程分别为CtH-FABP =-3.24375x+38.34230和Ct18S=-3.33137x+33.4573，相关系数（r2）分别为0.9964和0.9992，扩增效率分别为103%和99%；批内、批间重复性测定的变异系数分别为小于1.8%和10%；说明该方法灵敏度高、特异性强、准确可靠、重复性好，是实时荧光定量PCR检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白基因mRNA表达量的有效方法。