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旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库的构建及其步筛选
引用本文:刘明远,黎诚耀,吴秀萍,J F Fabien,付宝权,C Trap,卢强,张西臣,P Boireau.旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库的构建及其步筛选[J].中国兽医学报,2001,21(4):355-358.
作者姓名:刘明远  黎诚耀  吴秀萍  J F Fabien  付宝权  C Trap  卢强  张西臣  P Boireau
作者单位:1. 解放军军需大学 动物科技系,吉林 长春 130062
2. 法国食品安全局分子生物学实验室,Maison-Alfort France 94703
3. 1.解放军军需大学 动物科技系,吉林 长春 130062
基金项目:国家自然科学基金资助项目(NSFC-39670561, NSFC-39770565);中法先进研究计划(BT96-12)资助项目
摘    要:利用差减杂交(减法杂交,subtractive hybridization)技术,以旋毛虫新生幼虫(newborn larvae,NBL)的cDNA作为试验方(tester),以肌幼虫+成虫的cDNA作为驱动方(driver),制备新生幼虫差减cDNA,利用T载体构建NBL差减cDNA文库,获克隆株90个,以试验方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为试验方探针,以驱动方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针,在NBL差减cDNA文库中初筛NBL的期特异性克隆,获初筛克隆24个。这些初筛斯异性克隆进一步用Southern blot确认鉴定,获直阳性期特异性克隆2个(NBL SSC1,NBL SSC2).DNASIS以及Blaster的分析结果显示,这2个克隆为旋毛虫的2个新基因,其中NBL SSC1编码糖蛋白,NBL SSC2编码丝氨本蛋白酶,本试验为旋毛虫期特异性基困全长序列的调取,分析,鉴定以及强保护性抗原基因的筛选奠定了基础。

关 键 词:旋毛虫  新生幼虫  期特异性基因  差减文库  cDNA文库
文章编号:1005-4545(2001)04-0355-04
修稿时间:2001年4月26日

Establishment and Primary Screening of Subtractive cDNA Library of Trichinella spiralis Newborn Larvae
LIU Ming yuan ,LI Cheng yao ,WU Xiu ping,J F Fabien ,FU Bao quan ,C Trap ,ZHANG Xi chen ,P Boireau.Establishment and Primary Screening of Subtractive cDNA Library of Trichinella spiralis Newborn Larvae[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2001,21(4):355-358.
Authors:LIU Ming yuan  LI Cheng yao  WU Xiu ping  J F Fabien  FU Bao quan    C Trap  ZHANG Xi chen  P Boireau
Institution:LIU Ming yuan 1,LI Cheng yao 2,WU Xiu ping,J F Fabien 2,FU Bao quan 1,2,C Trap 2,ZHANG Xi chen 1,P Boireau 2
Abstract:
Keywords:
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