猪胰腺干细胞分离与培养 |
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引用本文: | 王赟,窦忠英,乔海,赵婷,杨春荣. 猪胰腺干细胞分离与培养[J]. 中国农业科学, 2008, 41(8): 2554-2562. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.08.048 |
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作者姓名: | 王赟 窦忠英 乔海 赵婷 杨春荣 |
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作者单位: | 西北农林科技大学国家干细胞生物技术中心陕西分中心 |
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基金项目: | 国家"863"项目 , 教育部重大项目 , 国家自然科学基金 , 陕西省重大科技专项 |
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摘 要: | 【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI 1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的小圆细胞。而后将血清浓度提高到15%以上继续培养;采用免疫组化方法对获得的细胞是否具有胰腺干细胞特征予以检测,并测定了细胞的生长曲线。【结果】在血清浓度提高后每个小圆细胞能快速增殖并形成一个克隆,经过这样增殖后的细胞可以连续传代,目前已传至60代。经免疫组化检测,细胞表达PDX-1、GLUT-2、vimentin等胰腺干细胞的标志;细胞也表达Glucagon、insulin、somatostatin、polypeptide等胰腺内分泌细胞的标志.【结论】通过本方法获得的细胞经检测确定为胰腺干细胞,在体外可自发分化形成胰胰内分泌部4种主要细胞。
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关 键 词: | 胎猪 胰岛 胰腺干细胞 糖尿病 |
收稿时间: | 2007-01-15 |
Isolation and Culture of Porcine Fetus Islet Stem Cell |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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