| 有效去除农杆菌和籼稻转化系统优化 |
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| 引用本文： | 曾千春,李旭刚,马炳田,陈松彪,徐鸿林,孟昆,魏晓丽,朱祯.有效去除农杆菌和籼稻转化系统优化[J].分子植物育种,2003(6). |
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| 作者姓名： | 曾千春 李旭刚 马炳田 陈松彪 徐鸿林 孟昆 魏晓丽 朱祯 |
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| 摘 要： | 为了提高根农杆菌籼稻转化效率,将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck和潮霉素磷酸转移酶基因hpt分别置于紧密相连的2个T-DNA上,构建载体pCDMARUSCK-HPT,电激法将表达载体转化农杆菌LBA4404获得工程菌.比较了提门叮和国产噻孢霉素对工程菌LBA4404的抑制效果,试验得出提门叮在500mg/L以内比噻孢霉素能更有效地去除水稻细胞中的农杆菌,而且低浓度条件下(250mg/L)就能有效地抑制工程菌LBA4404,并且有利于水稻转化细胞成功地再生植株.确立了工程菌LBA4404菌液浓度OD值0.8,浸染时间5min为明恢86合适的转化参数.在此基础上,采用优化的农杆菌介导法转化杂交籼稻优良恢复系明恢86,获得转基因植株127个克隆,转化效率4.5%.
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| 关 键 词： | 农杆菌 潮霉素磷酸转移酶基因 sck基因 籼稻 明恢86 |
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