高效电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用

大肠杆菌的高效电转化技术是构建大容量噬菌体抗体库的关键技术,为了制备高转化效率的大肠杆菌TGI感受态细胞,采用电转化方法探索该菌在对数生长期的不同生长阶段、细胞浓度、噬菌粒DNA含量、电场强度对电转化效率的影响。实验结果表明,在菌株处于对数生长期的0D600值为0．5时,收集细胞制备感受态,感受态细胞浓度为4．0×10m细胞／mL,噬菌粒pCANTAB—ScFvAFBI浓度为100pg/μL,电场强度为20kV／cm,此时制备的大肠杆菌TGI感受态细胞的电转化效率可达2．13×10,cfu／μg DNA。研究结果表明,利用本实验确定的参数,可以制备出大肠杆菌TGI高效电转化感受态细胞,为大容量噬菌体抗体库的构建奠定了坚实的基础。