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养殖刺参溃疡病杀鲑气单胞菌的分离、致病性及胞外产物特性分析
引用本文:杨嘉龙,周丽,邢婧,绳秀珍,战文斌.养殖刺参溃疡病杀鲑气单胞菌的分离、致病性及胞外产物特性分析[J].中国水产科学,2007,14(6):981-989.
作者姓名:杨嘉龙  周丽  邢婧  绳秀珍  战文斌
作者单位:中国海洋大学,教育部海水养殖重点实验室,山东,青岛,266003
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金;中国海洋大学资助;教育部重点实验室基金
摘    要:从患溃疡病的养殖刺参(Apostichopus japonicus)病灶处分离出1株优势菌H1,以浸浴、创伤浸浴、体腔注射和体壁肌肉注射等方式进行感染实验,证实菌株H1为养殖刺参溃疡病病原菌,并证明该菌通过体表创伤侵入的方式感染刺参,以创伤浸浴和体壁肌肉注射感染的LD50(半数致死量)分别为2.26×107CFU/尾和1.80×107CFU/尾。经形态学观察、生理生化特性分析和mini API系统鉴定,确定菌株H1为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida ma-soucida)。提取菌株H1的胞外产物(ECP)进行致病性实验,结果表明ECP可导致刺参死亡,其对刺参的LD50为5.24μg蛋白/g体质量。H1-ECP具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、几丁质酶和淀粉酶活性,并具有溶血素活性;对底物偶氮酪蛋白(Azocasin)作用的酶比活力可达到674.5活力单位/mg蛋白,最适作用温度为50℃;对热不稳定,70℃作用30 min时,酪蛋白酶活性降到0;100℃作用30 min,ECP对刺参的毒性消失;ECP酶活可被10 mmol/L EDTA完全抑制,可被5 mmol/L PMSF抑制98.8%,Ca2 和Mg2 可使酶活性分别提高约9%和4%。结论认为,该病原菌通过体表创伤侵入方式感染宿主刺参,菌株H1胞外产物是其对刺参致病的因子之一。

关 键 词:刺参  溃疡病  杀鲑气单胞菌  胞外产物  蛋白酶
文章编号:1005-8737-(2007)06-0981-09
修稿时间:2007年1月11日

Identification of Aeromonas salmonicida associated with skin ulceration of cultured sea cucumber Apostichopus japonicus and characterization of the extracellular products
YANG Jia-long,ZHOU Li,XING Jing,SHENG Xiu-zhen,ZHAN Wen-bin.Identification of Aeromonas salmonicida associated with skin ulceration of cultured sea cucumber Apostichopus japonicus and characterization of the extracellular products[J].Journal of Fishery Sciences of China,2007,14(6):981-989.
Authors:YANG Jia-long  ZHOU Li  XING Jing  SHENG Xiu-zhen  ZHAN Wen-bin
Abstract:
Keywords:Apostichepus japonicus  skin ulceration  Aeromonas salmonicida masoucida  extracellulose products(ECP)  protease
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