Ⅰ群禽腺病毒4型Penton基因的克隆及原核表达 |
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引用本文: | 高辉,张梦荷,冯茹,汤亚方,张毫,陈成,吕涛,王承宝,杨彦涛.Ⅰ群禽腺病毒4型Penton基因的克隆及原核表达[J].动物医学进展,2018(5). |
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作者姓名: | 高辉 张梦荷 冯茹 汤亚方 张毫 陈成 吕涛 王承宝 杨彦涛 |
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作者单位: | 西北农林科技大学动物医学院;陕西省杨凌区职业技术教育中心;西北农林科技大学生命科学学院 |
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摘 要: | 通过对Ⅰ群禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清4型毒株Penton基因的克隆及原核表达,获得可溶性表达的Penton蛋白。依据GenBank已公布的Ⅰ群禽腺病毒4型Penton全基因设计引物,对实验室保存有Ⅰ群禽腺病毒血清4型毒株进行PCR扩增及测序分析,并将Penton基因克隆至pCold-SUMO载体,然后进行诱导表达。测序结果及序列分析表明,Ⅰ群禽腺病毒血清4型毒株为近几年国内流行毒株的新型突变株,命名为SX17株(GenBank登录号为MF592716);SDS-PAGE电泳及Western blot结果表明,获得可溶性表达的Penton蛋白,且Penton蛋白表达、过柱的效果较好,分离后蛋白纯度可达到80%~90%。原核表达获得了可溶性表达的Penton蛋白,且纯化出的蛋白具有较高的纯度,为后续研究Ⅰ群禽腺病毒4型Penton蛋白的生物活性以及制备其蛋白抗体奠定了基础。
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