犬圆环病毒Rep蛋白的原核表达 |
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引用本文: | 汪伟,孙文超,曹亮,易驰喆,郑敏,鲁会军,金宁一.犬圆环病毒Rep蛋白的原核表达[J].动物医学进展,2018(7). |
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作者姓名: | 汪伟 孙文超 曹亮 易驰喆 郑敏 鲁会军 金宁一 |
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作者单位: | 军事兽医研究所;温州大学病毒学研究所;广西动物疫病预防控制中心 |
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摘 要: | 犬圆环病毒(CanineCV)是一种新发现的圆环病毒。制备针对CaineCV Rep的抗体,为建立CaineCV ELISA检测方法及研究Rep蛋白的功能奠定基础。以CaineCV基因组作为模板,扩增出Rep基因序列。PCR产物克隆至pET-28a原核表达载体上,获得了重组质粒pET(28a)-Rep。将重组质粒转入大肠埃希菌BL21感受态细胞后进行诱导表达,SDS-PAGE分析表明重组Rep蛋白在大肠埃希菌BL21中获得表达。Western blot分析表明,重组蛋白能与Anti-His标签抗体发生特异性反应。该研究构建了pET(28a)-Rep重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌中获得表达,为进一步制备Rep的抗体奠定了基础。
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