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蜘蛛拖丝蛋白基因逆转录病毒载体构建与检测
引用本文:安铁洙,宁方勇,王春生,朴善花,梁洋. 蜘蛛拖丝蛋白基因逆转录病毒载体构建与检测[J]. 中国兽医学报, 2013, 33(1): 64-68
作者姓名:安铁洙  宁方勇  王春生  朴善花  梁洋
作者单位:1. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150040
2. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北农业大学动物科学技术学院,黑龙江哈尔滨150030
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30771538,31000990,30771538)
摘    要:利用pIRES2-EGF和pMX载体以及前期获得的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)构建逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP.采用磷酸钙法将pMX-2S-IRES-EGFP质粒转染到PlatE细胞并获得重组逆转录病毒.通过小鼠成纤维细胞系NIH3T3检测病毒侵染能力,并采用PCR法检测蜘蛛拖丝蛋白基因在NIH-3T3细胞的整合状况.结果显示,成功构建了逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP;通过感染NIH-3T3细胞测定重组逆转录病毒滴度约为2×105 cfu/mL;PCR鉴定结果显示,目的基因2S-IRES-EGFP已整合入NIH-3T3细胞基因组中.

关 键 词:蜘蛛拖丝蛋白基因  逆转录病毒载体  重组逆转录病毒

Construction and detection of spider dragline silk protein gene retroviral vector
AN Tie-zhu,NING Fang-yong,WANG Chun-sheng,PIAO Shan-hua,LIANG Yang. Construction and detection of spider dragline silk protein gene retroviral vector[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2013, 33(1): 64-68
Authors:AN Tie-zhu  NING Fang-yong  WANG Chun-sheng  PIAO Shan-hua  LIANG Yang
Affiliation:1(1.College of Life Science,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China;2.College of Animal Science and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)
Abstract:
Keywords:
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