| 大豆查尔酮还原酶3基因（chr3）的克隆及体外催化活性分析 |
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| 引用本文： | 张 超,王丕武,张 卓. 大豆查尔酮还原酶3基因（chr3）的克隆及体外催化活性分析[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2015, 43(9): 89-96 |
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| 作者姓名： | 张 超 王丕武 张 卓 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学 农学院,吉林农业大学 农学院,吉林农业大学 生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目“大豆查尔酮还原酶（CHR）在大豆苷元合成中的作用机理”（31171568） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆大豆查尔酮还原酶3基因(chr3),并分析其编码蛋白体外催化活性,为研究大豆苷元的合成与调控研究提供参考。【方法】以大豆品种"吉农17"为材料,采用RACE技术扩增大豆chr3基因,对其编码蛋白的结构和功能位点进行分析。将目的基因chr3连接到大肠杆菌载体pET28a上,然后转化到大肠杆菌BL21中,构建重组大肠杆菌原核表达载体BL21-pET28a-chr3,并通过高效液相色谱技术(HPLC)验证重组蛋白的催化性质及效率。【结果】成功克隆chr3基因,其全长序列长1 416bp(GenBank登录号:KF927169),成功构建了大肠杆菌原核表达载体BL21-pET28a-chr3。HPLC检测结果表明,重组蛋白CHR3催化合成了异甘草素,使大豆异甘草素含量提高到了33.673μmol/g。【结论】分离鉴定了大豆chr3,其编码蛋白CHR3催化活性明显提高。
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| 关 键 词： | 大豆；大豆苷元；查尔酮还原酶3基因；基因克隆；大肠杆菌 |
| 收稿时间： | 2014-01-20 |
Cloning of soybean chalcone reductase gene (chr3) and its expression in Escherichia coli |
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| ZHANG Chao,WANG Pi-wu and ZHANG Zhuo. Cloning of soybean chalcone reductase gene (chr3) and its expression in Escherichia coli[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2015, 43(9): 89-96 |
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| Authors: | ZHANG Chao WANG Pi-wu ZHANG Zhuo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soybean daidzein chalcone redutase 3 gene (chr3) gene cloning Escherichia coli |
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